异种骨/重组人骨形态发生蛋白7/纤维蛋白胶复合材料的缓释性能及成骨活性

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.10.009

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
骨形态发生蛋白：是现今已知作用最强的骨诱导因子，在促进骨缺损修复和骨折愈合过程中有非常明显的效果。骨形态发生蛋白的稳定缓慢释放是其诱导成骨作用的前提，骨形态发生蛋白在体内很容易被体液稀释或各种蛋白酶降解，因此，需要合适的载体使骨形态发生蛋白缓慢释放；然而，迄今为止还没有一种医学界公认的骨形态发生蛋白理想载体。
异种骨/重组人骨形态发生蛋白7/纤维蛋白胶复合材料：利用异种骨支架材料的孔隙三维结构与自体骨相近，利于血管等长入及骨形态发生蛋白黏附的特性，同时发挥异种骨移植物的支架材料骨传导作用，采用真空负压吸附方法将重组人骨形态发生蛋白7负压吸附在异种骨支架材料上；然后再利用纤维蛋白胶的黏合力强、生物相容性好、抗原性弱、易于降解等特性，将异种骨材料及纤维蛋白胶二者结合，更利于发挥异种骨复合材料作为骨形态发生蛋白载体的缓释作用，具有理论及实际操作上的可行性和实用性。

背景：骨形态发生蛋白的稳定缓慢释放是其诱导成骨作用的前提，因此需要合适的载体使骨形态发生蛋白缓慢释放，然而迄今为止还没有一种医学界公认的骨形态发生蛋白理想载体。
目的：评价异种骨复合材料中骨形态发生蛋白7的缓释情况及成骨活性。
方法：以异种小牛松质骨为支架材料，采用真空负压吸附法将含重组人骨形态发生蛋白7的溶液吸附在支架材料上，再喷涂纤维蛋白胶涂层，制备异种骨/重组人骨形态发生蛋白7/纤维蛋白胶复合材料，作为实验组材料；将小牛松质骨、小牛松质骨/重组人骨形态发生蛋白7复合材料分别作为空白组、对照组材料。将3组材料分别在PBS中持续浸泡28 d，观察重组人骨形态发生蛋白7的缓释情况；将3种材料分别与第3代髓间充质干细胞共培养，检测培养1，3，7，14 d的细胞碱性磷酸酶活性、骨桥蛋白和骨钙素表达水平。
结果与结论：①空白组无重组人骨形态发生蛋白7释放，实验组重组人骨形态发生蛋白7的缓释效果优于对照组；②实验组、对照组培养不同时间点的碱性磷酸酶活性、骨桥蛋白和骨钙素表达水平均高于空白组(P < 0.05)，实验组培养14 d的细胞碱性磷酸酶活性、骨桥蛋白和骨钙素表达水平均高于对照组(P < 0.05)；③结果表明：异种骨/重组人骨形态发生蛋白7/纤维蛋白胶复合材料具有良好的缓释性能及成骨活性。

ORCID: 0000-0003-2353-5481(张建华)

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

关键词: 生物材料, 骨生物材料, 异种骨, 复合物, 骨形态发生蛋白, 缓释, 成骨活性

Abstract:

BACKGROUND: Sustained release of bone morphogenetic proteins (BMPs) at stable speed is a prerequisite for osteogenic induction. Therefore, a suitable carrier for the sustained release of BMPs is required. However, there is no ideal carrier for BMPs as yet.
OBJECTIVE: To explore the sustained release process of BMP-7 and osteogenic activity in the xenogeneic bone composite that is the compound of xenogeneic bone, recombinant human BMP-7 (rhBMP-7) and fibrin sealant (FS).
METHODS: With the xenogeneic cattle spongy bone as a scaffold material, the solution containing rhBMP-7 was adsorbed onto the scaffold by means of vacuum negative pressure absorption, and fibrin sealant (FS) was sprayed onto the surface of the scaffold. The xenogeneic bone composite was made up of these three materials as sustained release materials. All scaffold materials were randomly divided into three groups: blank group (the scaffold material was xenogeneic bone with no rhBMP-7 and FS), control group (the scaffold material was xenogeneic bone with rhBMP-7) and experimental group (the scaffold material was the composite material of xenogeneic bone, rhBMP-7 and FS). All samples were immerged into phosphate buffer solution for 28 continuous days, and the release levels of rhBMP-7 from the samples were measured by high performance liquid chromatography at various set time. All the scaffold materials were co-cultured with passage 3 bone marrow mesenchymal stem cells. Alkaline phosphatase activity, osteopontin and osteocalcin expression levels were detected at days1, 3, 7, and 14 after co-culture
RESULTS AND CONCLUSION: rhBMP-7 was not detected in the blank control group, and the sustained release of rhBMP-7 in the experimental group was better than that in the control group. The alkaline phosphatase activity, osteopontin and osteocalcin levels were ranked as follows: blank control group < control group < experimental group, and there was a significant difference between groups (P < 0.05). These findings indicate that the xenogeneic bone/rhBMP-7/FS composite material as a good sustained-release carrier of BMP-7 shows strong osteogenic activity.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

Key words: Bone Morphogenetic Protein 7, Fibrin Tissue Adhesive, Delayed-Action Preparations, Tissue Engineering

中图分类号:

R318

张建华. 异种骨/重组人骨形态发生蛋白7/纤维蛋白胶复合材料的缓释性能及成骨活性[J]. 中国组织工程研究, 2017, 21(10): 1527-1531.

Zhang Jian-hua. Sustained release ability and osteogenic activity of xenogeneic bone/recombinant human bone morphogenetic protein 7/fibrin glue composite material[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2017, 21(10): 1527-1531.

图/表（结果） 4

2.1 异种骨复合材料中重组人BMP-7的缓释情况通过高效液相色谱分析仪检测实验组及对照组各个时间点浸出液中重组人BMP-7的含量和浓度，见表1，空白组各时间点检测结果示浸出液中无重组人BMP-7释放。实验组异种骨复合材料第1天释放材料中所含重组人BMP-7量的30%，第2天释放材料中重组人BMP-7量的11.3%，第3天释放材料中重组人BMP-7量的6.1%，第四五天释放材料中重组人BMP-7量的10.4%，第六七天释放材料中重组人BMP-7量的9.1%，第8-14天释放材料中重组人BMP-7量的8.3%，第15-21天释放材料中重组人BMP-7量的5.5%，第22-28 天释放材料中重组人BMP-7量的2.9%。通过各个不同时间点检测的重组人BMP-7释放量发现，实验组重组人BMP-7的缓释规律为：第1天表现为“爆发性”释放(30%)，第2-7天重组人BMP-7出现快速释放，第8-14天释放速度减慢，第15-28天出现缓慢而持久的释放，至4周时释放量达83.6%。对照组重组人BMP-7的缓释规律为：第1天大部分释放，后期释放很少，且1周以后释放量为0。实验组缓释效果明显优于对照组。

2.2.1 碱性磷酸酶活性检测结果各组不同时间点均可检测到骨髓间充质干细胞内的碱性磷酸酶活性，其结果见表2。

实验组及对照组细胞呈现出很高的碱性磷酸酶活性，但随培养时间的延长，实验组碱性磷酸酶活性逐渐增高，而对照组变化不明显，1周以后呈现下降趋势。培养1，3 d时，实验组及对照组碱性磷酸酶活性比较差异无显著性意义，而1周以后组间比较差异有显著性意义(P < 0.05)。空白组碱性磷酸酶活性保持在一个低水平，且随时间推移无明显改变。实验组、对照组各检测时间点碱性磷酸酶活性高于空白组(P < 0.05)。

2.2.2 骨桥蛋白及骨钙素水平检测结果用实时PCR 可检测各组骨髓间充质干细胞中骨桥蛋白及骨钙素的表达，见表3，4。

实验组中骨桥蛋白及骨钙素的表达随着时间的推移而显著增加，对照组中骨桥蛋白及骨钙素的表达随着时间的推移缓慢增加。培养第1，3天时，对照组骨桥蛋白及骨钙素表达水平略高于实验组，但差异无显著性意义；培养7 d时，两组骨桥蛋白及骨钙素表达水平一致，组间比较差异无显著性意义；培养14 d时，实验组骨桥蛋白及骨钙素表达水平明显高于对照组(P < 0.05)。空白组骨桥蛋白及骨钙素的表达水平始终维持在低水平，明显低于相对于实验组及对照组(P < 0.05)。

参考文献

[1]应吕方,贾叙锋,程尹,等.硫酸钙人工骨复合培养骨髓间充质干细胞对骨诱导脊柱融合的影响[J].中国组织工程研究, 2016,20 (43): 6396-6402.

[2]高维诺,侯晓薇,樊世锋,等.富血小板纤维蛋白复合异种骨修复兔牙槽骨缺损的实验研究[J].中国保健营养(中旬刊), 2014,25(5): 3354-3355.

[3]李冰婷,贾莹珍,刘志芳,等.富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物修复骨缺损及骨整合的作用[J].中国组织工程研究, 2014, 8(52):8376-8381.

[4]蒋李青,方炳木,赵冬梅,等.富血小板血浆复合人工骨植骨治疗骨折不愈合合并骨缺损[J].中医正骨,2016,28(12):58-60.

[5]柴旭斌,周英杰,郑怀亮,等.纳米羟基磷灰石/聚酰胺66人工骨块在颈椎后路双开门椎管成形术中的应用[J].中医正骨, 2016, 28(8):32-34.

[6]郑园娜,吴刚,吴向阳,等.RhBMP2/7和rhBMP2、rhBMP7诱导MC3T3-E1细胞成骨分化相关基因表达的比较研究[J].口腔生物医学,2010,1(1):10-15.

[7]Lu C,Xing Z,Yu YY,et al.Recombinant human bone morphogenetic protein-7 enhances fracture healing in an ischemic environment.J Orthop Res.2010;28(5):687-696.

[8]杨允,邓春梅,韩明,等.人骨形态发生蛋白7在中国仓鼠卵巢细胞中的表达研究[J].生物技术,2012,22(2):23-26.

[9]孙平.RhBMP2/7异源二聚体促进种值体周围骨缺修复和诱导成骨细胞通路初步探讨[D].浙江大学,2011.

[10]董晓红,叶建明,刘其锋,等.BMP7对CsA诱导的NRK-52E细胞EMT的影响[J].现代中西医结合杂志,2013,22(35):3893-3895.

[11]Valimaki VV,Aro HT.Molecular basis for action of bioactive glasses as bone graft substitute.Scand J Surg. 2006;95(2): 95-102.

[12]Keskin DS,Tezcancer A,Korkusuz P,et al. Collagen-chondroitin sulfate-based PLLA-SAIB-coated rhBMP-2 delivery system for bone repair.Biomaterials.2005; 26(18):4023-4034.

[13]吴五洲,喻爱喜,孙艳玲,等. 壳聚糖作为rhBMP-2体外缓释载体的实验研究[J].中华显微外科杂志,2006,29(3):214-216.

[14]朱慧勇,吴求亮,申屠建中,等.多孔聚乳酸-聚乙醇酸共聚物作为缓释重组人骨形态发生蛋白-2 载体的实验研究[J].中华创伤杂志,2004,20(10):602-605.

[15]吴斌,郑启新,郭晓东,等.纳米羟基磷灰石和重组胶原及聚乳酸复合材料作为骨形态发生蛋白2活性多肽缓释载体的实验研究[J].中华关节外科杂志:电子版,2007,1(5):302-306.

引言

目前，因创伤、疾病等因素导致的骨缺损日益常见，对于骨缺损的治疗也一直是骨科界研究的热点和难题^[1-3]。骨移植是目前治疗骨缺损和促进骨愈合最可靠、最常用的方法。自体骨是理想的骨移植修复材料，同时具有骨传导性和骨诱导性，但其来源有限，但存在增加创伤、供骨区常导致不同程度的并发症等问题；同种异体骨来源也有限且存在传播疾病的风险；异种骨来源广泛、价格低廉，经处理后经有骨传导性，无骨诱导性，具有强烈的排斥反应；人工骨则降解极其困难^[4-6]。由于单一材料各自的局限性，难以满足同时具有骨传导性及骨诱导性的要求，因此寻找理想的骨修复材料，探索自体骨替代物，一直是骨科学界研究的重要课题和关注热点。

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)是现今已知作用最强的骨诱导因子，在促进骨缺损修复和骨折愈合过程中有非常明显的效果^[7-8]。BMPs的稳定缓慢释放是其诱导成骨作用的前提，BMPs在体内很容易被体液稀释或各种蛋白酶降解；因此，需要合适的载体使BMPs缓慢释放；然而，迄今为止还没有一种医学界公认的BMPs理想载体。与此同时，既往研究已证实重组人BMP-7能够有效促进骨愈合、修复骨缺损，其在动物及临床治疗骨缺损和促进骨融合上已取得了一些成果。实验通过制备异种骨复合材料(异种骨复合重组人BMP-7、纤维蛋白胶复合物)，探索BMPs的缓释载体，通过对一些宏观及微观的科学检测方法和手段，了解异种骨复合材料中BMPs的缓释情况及成骨活性，探讨异种骨复合材料作为BMPs载体的可行性，为临床应用提供有益的实验依据和理论支持。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

材料方法

1.1 设计观察性实验。

1.2 时间及地点实验于2015年9月至2016年3月在河北沧州中西医结合医院东院区骨伤科一病区实验室完成。

1.3 材料

实验材料与试剂：小牛异种松质骨(解放军第四军医大学西京医院全军骨科研究所实验中心)；冻干人凝血酶溶解液、冻干人纤维蛋白原溶解液(广州倍绣生物技术有限公司)；重组人BMP-7(北京博奥森生物科技有限公司)；碱性磷酸酶检测试剂盒(南京建成生物有限公司)；Trizol试剂(总RNA抽取试剂，中国上海江莱生物科技有限公司)；甲醇(批号200410019，中国上海振兴化工厂)；胎牛血清、DMEM高糖培养基(美国 Gibco公司)；PBS(上海碧云天生物科技有限公司)。

实验仪器：高效液相色谱分析仪(Biologic Duroflow，美国Bio-Rad公司)；色谱柱(Catalog 125-0551，美国Bio-Rad公司)；冷冻干燥系统(77520-01 FreeZone b，美国Labconco公司)；图像分析仪(HPIAS-1000，中国千屏)；PCR仪（西安天隆科技有限公司）；PCR逆转录试剂盒(西安天隆科技有限公司)；倒置相差显微镜(日本 Olympus公司)；DYY-6C型电泳电源(北京六一公司)；电泳仪及附件(北京六一公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 实验分组所有缓释及成骨活性材料均分为3组：实验组，即异种骨复合材料组，包含异种骨复合重组人BMP-7、纤维蛋白胶材料；对照组，包含异种骨复合重组人BMP-7材料，无纤维蛋白胶材料；空白组，仅仅包含异种骨材料，无重组人BMP-7及纤维蛋白胶材料。

1.4.2 复合重组人BMP-7异种骨复合物的制备无菌操作台内首先将500 μg的重组人BMP-7溶于1 mL的pH值4.5的谷氨酸/谷氨酸钠缓冲液中，再5 g小牛异种松质骨浸泡于上述重组人BMP-7缓冲溶液中，浸泡24 h后，放置于冷冻干燥机内抽真空、透析、冻干24 h，EP管分装，制成异种骨/重组人BMP-7复合物，密封包装，真空冷冻干燥后环氧乙烷消毒，无菌包装备用。

1.4.3 异种骨复合材料的制备首先使用一支2 mL注射器抽吸冻干人纤维蛋白原溶解液，注入冻干人纤维蛋白原瓶内，获得冻干人纤维蛋白原溶液；然后使用另一支2 mL注射器抽吸冻干人凝血酶溶解液，注入冻干人凝血酶瓶内，进而获得冻干人凝血酶溶液。注射器分别抽吸冻干人纤维蛋白原溶液及冻干人凝血酶溶液各2 mL，混合，形成纤维蛋白胶，然后将其卡入推液架上，再把注射针针座或喷嘴安装到连接针座的锥头上，将两注射器锥头牢固地连接到连接针座上，安装完毕后，检查无松动渗漏，匀速、均衡地推动注射器联杆，无菌条件下点布或喷涂到无菌异种骨/重组人BMP-7复合物上，静置干燥，形成异种骨/重组人骨形态发生蛋白7/纤维蛋白胶复合材料，即异种骨复合材料。

1.4.4 重组人BMP-7体外缓释模型的建立将3组分别浸润在3 mL PBS中，充分摇匀后置入恒温箱(37 ℃)，以建立重组人BMP-7体外缓释模型。随后，在不同时间点(第1，2，3，5，7，14，21，28天)提取释放液，检测检测浸出液中重组人BMP-7的含量和浓度，含量检测采用高效液相色谱仪。

1.4.5 异种骨复合材料的成骨活性 6周龄雄性BALB/C小鼠骨髓间充质干细胞的分离和培养由河北沧州医科大学动物实验中心进行。取生长良好的第3代髓间充质干细胞，接种密度为2×10³，分别与3组材料共培养1，3，7，14 d。

碱性磷酸酶活性检测：检测细胞碱性磷酸酶活性。

实时 PCR 法检测细胞内骨桥蛋白和骨钙素表达：参照参考文献[9-10]及相关试剂盒说明进行。提取总RNA和备置cDNA后，进行反转录反应；实时PCR反应引物的合成设计借助引物设计软件Primer Premier 5.0。反应条件为 95 ℃预变性30 s，随后进行45个循环，95 ℃持续10 s，60 ℃持续10 s，72 ℃持续15 s，之后进行溶解(95 ℃持续5 s，60 ℃持续60 s)。骨桥蛋白，上游引物：5’-CCA CAT GGC TAA ACC CTG ACC-3’，下游引物：5’-CAT GGC TTT CGT TGG ACT TAC TTG-3’；骨钙素，上游引物：5’-GAA CAG ACA AGT CCC ACA CAG-3’，下游引物：5’-CAG GTC AGA GAG GCA GAA TG-3’。以GAPDH为内参，上游引物：5’-TCC CGC CAA CAT CAA A-3’，下游引物：5’-TGA CCT TGC CCA CAG C-3。

1.5 主要观察指标各组材料的重组人BMP-7缓释情况；骨髓间充质干细胞与各组共培养后的碱性磷酸酶活性及骨桥蛋白和骨钙素表达。

1.6 统计学分析应用SPSS 17.0 统计学软件进行处理，数据以x(_)±s表示，采用t 检验，P < 0.05 示差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

讨论

目前，在有关骨形态发生蛋白载体的研究中，为优化载体的性能，更好地发挥BMPs的骨诱导作用，许多学者综合无机载体和有机载体的特点，将两类材料载体进行组合配制成复合载体，复合载体因能改善单一载体材料的不足，成为当前BMPs载体研究的焦点^[9-11]。迄今为止，已有大量实验研究证实，BMPs与载体或支架材料复合修复骨缺损的成骨效果显著，复合材料发挥了较好的骨传导性及骨诱导性功能，已展示出良好的应用前景。实验采用的异种骨复合材料(即异种骨复合重组人BMP-7、纤维蛋白胶复合物)含有异种骨支架材料及纤维蛋白胶，实为一含骨形态发生蛋白的复合载体，利用异种骨支架材料的孔隙三维结构与自体骨相近，利于血管等长入及骨形态发生蛋白黏附，同时发挥异种骨移植物的支架材料骨传导作用的特性，采用真空负压吸附方法将重组人BMP-7负压吸附在异种骨支架材料上；然后再利用纤维蛋白胶的黏合力强、生物相容性好、抗原性弱、易于降解等特性，因目前已有报道将纤维蛋白单独作为BMPs缓释载体缓释效果较好；作者将异种骨材料及纤维蛋白胶二者结合，更利于发挥异种骨复合材料作为BMPs载体的缓释作用，具有理论及实际操作上的可行性和实用性。

合成包裹负载方式是将BMPs包裹其中，缓慢释放BMPs；因潜在影响因素较多，负载时需进行精确控制，此种方式技术要求较高；然而，通过控制BMPs的浓度和量，可较好地调节控制BMPs缓释的速度与时间^[12]。当然，吸附和包裹两种形式存在复合载体BMPs缓释过程中亦具有特定的作用。在BMPs缓释早期，物理吸附的BMPs快速释放，迅速达到BMPs有效诱导成骨浓度，缓释后期，合成包裹方式因可长久维持并缓慢释放BMPs，延长BMPs诱导成骨的作用。因此，科学、合理应用两种负载方式，对于制备BMPs理想载体有着十分重要的意义。此次实验部分即是通过制备异种骨复合材料，将BMPs以吸附和包裹的方式结合起来制成多种负载方式的BMPs载体，以达到BMPs缓释目的，促使其BMPs诱导成骨作用缓慢释放，有益于骨缺损的修复。

随着材料的降解反应及材料的吸水膨胀，蛋白质分子从材料微孔或降解的材料表面扩散出来，呈现出持续缓慢稳定的释放，出现这种现象可能是蛋白质的浓度差逐渐变小而导致释放减慢^[14]。实验结果显示，重组人BMP-7从异种骨复合材料中4周时释放80%左右，全部完全释放尚需更长的时间，异种骨复合材料这种BMPs的缓释作用为新生骨组织的生长和成熟提供时间，有力地促进成骨作用。吴斌等^[15]在研究负载BMP-2活性多肽的骨组织支架材料时就发现，体外BMP-2活性多肽释放在4周左右释放量达到89.6%，复合了BMP-2活性多肽的材料对于新生骨组织的

形成有重要作用。同时，重组人BMP-7缓慢而持久的缓释行为与载体特性有关，载体材料的孔径大小、孔隙率、疏松程度及材料的重结晶、降解均影响着重组人BMP-7的缓释过程。实验中的PBS是固定的、非生物性和非代谢性的，而体内组织液处于不断的代谢和流动中，因此，可以判定重组人BMP-7在体内的缓释行为将是更加复杂的过程。

此次实验部分就是利用骨形态发生蛋白诱导刺激骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞，并表达碱性磷酸酶和分泌骨桥蛋白和骨钙素的，建立一套综合评价生物材料诱导成骨活性的体外检测法，并使用这种体外成骨活性检测法对异种骨复合材料的成骨活性进行测定与评价。由实验部分结果可知，实验组及对照组细胞早期呈现出较高的碱性磷酸酶活性，随培养时间的延长，实验组碱性磷酸酶活性逐渐增高，而对照组变化不明显；异种骨复合材料与骨髓间充质干细胞共培养3 d时碱性磷酸酶活性达到高峰，共培养7 d以后呈现逐步下降趋势。培养1，3 d时，实验组及对照组碱性磷酸酶活性比较差异无显著性意义，而1周以后组组间比较差异有显著性意义。空白组碱性磷酸酶活性保持在一个低水平，且随时间推移无明显改变。空白组各检测时间点碱性磷酸酶活性明显低于实验组、对照组(P < 0.05)。异种骨复合材料显示的碱性磷酸酶活性与国内外权威研究报道表现相似的缓释活性改变，即在成骨细胞分化早期可见碱性磷酸酶活性明显增加。同时，根据实验部分结果发现，实验组骨桥蛋白和骨钙素的表达随着时间的推移而显著增加，对照组骨桥蛋白和骨钙素的表达随着时间的推移呈缓慢增加。培养第1，3天时，对照组骨桥蛋白和骨钙素表达水平略高于实验组，但差异无显著性意义；培养7 d时，两组表达水平一致，差异无显著性意义，1周以后实验组表达水平明显高于对照组(P < 0.05)。空白组骨桥蛋白和骨钙素的表达水平维持在低水平，明显低于实验组及对照组 (P < 0.05)。

综合上述结果可知，异种骨复合材料显示的骨桥蛋白和骨钙素表达逐渐升高，且升高规律以后期升高明显为特点，而骨桥蛋白和骨钙素晚期升高明显，可见异种骨复合材料诱导成骨活性较持久，对促进骨修复及治疗骨缺损有着重要的理论及临床意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程